色譜柱的平衡及組成

色譜柱由柱管、壓帽、卡套（密封環(huán)）、篩板（濾片）、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成，壓力不高于70 kg/cm2 時(shí)，也可采用厚壁玻璃或石英管，管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效，減小管壁效應(yīng)，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度，其效果與拋光相同。還有使用熔融硅或玻璃襯里的，用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板，是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金，孔徑0.2~20μm(5~10&μm)，取決于填料粒度，目的是防止填料漏出。

色譜柱是由柱管和固定相組成，按照拄管的粗細(xì)和固定相的填充方式分為（1）填充柱；（2）毛細(xì)管柱。

色譜柱的平衡

反向色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在甲醇（或乙腈）/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的活動(dòng)相和甲醇（或乙腈）/水互溶，由于色譜柱在運(yùn)輸過程中可能會(huì)干掉，因此在用活動(dòng)相分析樣品之前，應(yīng)使用分10-20倍的體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱。

    假如您所使用的活動(dòng)相中含有緩沖鹽，應(yīng)留意用含水量很高（約95%）的活動(dòng)相過渡，樣品分析完后，沖洗柱子是亦然。過往傳統(tǒng)的方法使用純水沖洗，對(duì)于非極性柱，如C8或C18，由于純水不能浸潤(rùn)填料表面而沖倒碳鏈，造成柱效下降。

    另外，分析樣品時(shí)，由于純水在填料表面不能浸潤(rùn)形成水膜，出現(xiàn)樣品不保存而分不開，重現(xiàn)性差，所以對(duì)于一般的C18或C8，有機(jī)溶劑不能低于5%。硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。假如該色譜柱需要使用含水或甲醇或乙腈的活動(dòng)相，請(qǐng)?jiān)谑褂没顒?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡。

    色譜柱在平衡過程中，將流速緩慢地進(jìn)步用活動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線（緩沖鹽或離子對(duì)試劑濃度假如較低，則需要較長(zhǎng)的時(shí)間平衡）。